抗菌制品测试方法及标准

近年来，国内抗菌行业的专家与学者的也做了大量探索，促进了国内抗菌产业的发展，并制定了相关的标准。如FZ/T　01021－1992＜织物抗菌性能试验方法＞、GB15975－1995＜一次性使用卫生用品卫生标准＞及＜消毒技术规范＞等。

检测抗菌性能的抗菌制品一般分为三大类型：第一种为抗菌纺织品，第二种为抗菌塑料，第三种为抗菌陶瓷。其中的检测方法中包括对细菌的检测和对霉菌的检测。一般抗菌制品的测试方法分为定量试验方法和定性试验方法，也有的分为适于溶出型和非溶出型抗菌剂的检测，还有的是按照菌液接种于织物上和织物置于一定浓度的菌液中两条思路来分类。

抗菌标准及测试方法的合理性及正确性对整个抗菌产业的发展起着重要的作用，包括测试方法设计的准确性与科学性，操作误差的合理控制，以及试验本身所带来的误差大小等。随着国内外抗菌产业的兴起和科技的进步，也促使抗菌标准与方法不断完善。其中，国外抗菌产业的发展已经有几十年的历史，所以较早就提出了具有代表性和稳定性的抗菌测试方法，近年来又作了修改与完善。

下面分别对抗菌纺织品及相关抗菌制品抗菌（细菌和霉菌）检测方法进行阐述。

一、抗菌纺织品测试方法

用于抗菌纺织品的测试方法如下：

1.奎因试验法（QUINN TEST）

该方法是QUINN创立的织物抗菌性能测试方法，发表在<>{14（1），1-7,1966. 14（2），183-188,1966}。该方法的基本原理是将试验菌液接种于织物上，再覆盖以半固体琼脂培养基，在一定条件下培养一段时间后，观察织物上的菌落数，计算出抑菌率。该方法也是世界上第一部测试织物抗菌能力的定量测试方法，简洁方便，应用广泛。

2.平行画线法（条纹法）：

此种测试方法为简易、快速的定性试验方法，适用于耐水洗和耐干洗的抗菌整理织物的抗菌特性测试，其原理为：通过划平行线的方法将菌液接种于琼脂培养基上，将样品贴于琼脂表面上，在一定条件下培养一段时间后，检查琼脂表面沿划线部位由于细菌繁殖中断而出现的清洁区，为抗菌活性的大小划分等级，评价织物抗菌能力的大小。

3.改良的奎因试验法：

著名的青岛医学院微生物学专家邹承淑教授（笔者的重要合作伙伴）在八十年代初开始改进QUINN TEST，之后经过国内医学界共同努力完成了中国版的QUINN TEST--改良的奎因试验法。本方法是在奎因试验法的基础上作了修改，原理也是将试验菌液接种于织物上，覆盖以培养基，经一定时间培养后，观察计数抗菌和未抗菌织物上的菌落数，计算抗菌率的大小，定量测试抗菌织物的抗菌性能。本方法是一种简便、快速、重现性好的定量试验方法，对于原始的奎因试验法相比，具有以下优点：

①一次能测试几种不同织物对同一种细菌的抗菌性能，提高了测试效率，节省时间。

②接种菌液浓度小（6000个/ml），营养充足，菌落变大，易用肉眼来直接观察菌落的生长，避免用显微镜观察造成污染。

③稀释菌液用生理盐水代替肉汤，避免稀释过程中细菌增长，影响试验准确性。

④省略了织物加菌液后，在一定的相对湿度下干燥的过程，简化了实验步骤，也避免了干燥过程中因温度掌握不准而使细菌死亡的弊病。

但本方法中也存在一些不足之处：

④本方法在覆盖琼脂培养基步骤中，为避免培养基溢出样品外，将加菌液后的样品平皿放入冰箱内15min，其中没有规定具体的温度，不适合的温度会造成细菌的死亡或增长，一般在5-10℃能保证细菌不会死亡且不会增长，但本方法中没有规定，在样品的挪动过程中从而会影响试验结果。

4.抑菌环试验法（晕圈法）：

将试验菌接种于琼脂培养基平板表面，再贴放上试验样品，由于抑菌剂不断溶解以致在琼脂中扩散形成抑菌环，通过测量抑菌环的宽度来评价抗菌能力的大小。

5.AATCC　100试验法

此种测试方法为美国AATCC委员会提出的一种定量测试方法，用于检测织物的杀菌能力和抑菌能力，是目前国外比较著名的抗菌性能测试方法，也是后来国内外一些新方法的起源。此方法的原理为：织物对照样与试样经细菌接种并在一定条件下培养后，加入中和液来洗脱细菌，且用稀释平板法测定洗脱液中的菌液浓度，进行活菌培养计数，得到抗菌织物的细菌减少百分率，评价该织物抗菌杀菌性能。

6.JIS　L　1902　2002试验方法

本标准是在JIS　L　1902　1998试验方法的基础上又进一步修改而成的试验方法，本方法也是介绍了两种试验方法，定性试验方法和定量试验方法，但是定量试验方法介绍了两种，分别为菌液吸收法和细菌接种法，其定性方法（抑菌环法）和菌液吸收法同JIS　L　1902　1998标准中原理及方法基本相同，其细菌接种法原理是将细菌在加压条件下接种至调湿过的试验片上，然后在一定湿度下培养一段时间，再对样品进行洗脱，活菌计数，得细菌减少值。

本方法对不同试验目的和用途及织物不同处理应用的试验细菌作了详细的规定，并且介绍了菌液吸收法用于测定织物灭菌活性值，用细菌接种法，计算细菌减少值。

7.JIS　Z　2911抗霉菌试验法

本方法是针对于霉菌而制定的一种测试方法，其基本原理为：在样品及培养基上均匀地喷洒一定量的混合孢子悬液，培养一定时间后，观察试样上的长霉情况，对抗霉菌性能进行分等级定性评价。

8.振荡烧瓶法：

振荡烧瓶法是模仿人体的穿着条件，使细菌在振荡条件（300r/min）下与织物内抗菌剂接触，振荡1-6h之后，经细菌培养计数，计算细菌减少百分率，从而确定抗菌性能大小。

应用此测试方法时，被测试样不受纺织品形状的限制，本方法不仅适用于一般的纺织织物，而且还适用于凹凸不平的织物、有毛或羽的织物和粉末状织物等，其使用范围广泛。而且还可适用于抗菌塑料、抗菌瓷砖等抗菌制品。塑料等拒水性材料应先将其制成微粒再进行试验。

9.FZ/T　01021－92试验方法

此方法是国内根据美国的AATCC100－1981制定的纺织行业标准，是测试抗菌性能的一种定量测试方法。其基本原理为：将试验菌接种于织物（对照样和试样）上，经“0”接触时间培养和一定时间培养后，对样品进行洗脱，然后对其洗脱液进行活菌计数，计算出试样的细菌减少百分率。本方法对活菌培养计数中平皿菌落数的测定作了非常细致的规定，但是，本标准中一定时间培养后用100ml缓冲液洗脱，剧烈摇晃1min，此工艺还有待于探讨，因为剧烈摇晃有可能会造成细菌的增长或减少，就会影响试验结果。

10.JIS　L　1902　1998试验方法

此方法为日本的工业标准，规定了定性试验方法（晕圈法）和定量试验方法（浸渍法）。其中定性试验方法只可测试出是否具有抗菌性能，而不能准确测定出抗菌率。但此方法非常简便，易于操作。其原理为将试样放于平板培养基中心，经一段时间培养后，观察样品周围产生的抑菌环，计算抑菌环宽度，评价试样是否具有抗菌能力。同时，其试验有效性的判定也非常简便，观察未处理样品经培养后有没有出现细菌增值即可。本方法中还对试样的要求作了非常细致的规定，包括织物、纱线、软填料和长绒毛等。

定量试验方法（浸渍法）原理也是通过对试样接种细菌与培养，对“0”时间接触培养和一定时间培养后进行活菌计数，计算出抑菌活性值和杀菌活性值。本方法特点为：

①不同于其它方法中通过比浊管比浊来粗测菌液浓度的方法，而是用分光光度计测定其吸收率来确定菌液浓度，提高了试验的准确度。

②用冷冻的生理盐水（0.85%）来洗脱培养后样品，避免细菌在洗脱过程中增长或减少，保证所需测定细菌数的准确性，减少试验误差。

③在计算结果时，应用抑菌活性值和杀菌活性值比较全面的来表现试样的抑菌和杀菌能力，而且应用对数值来体现试验结果。